陆时羡闻言一笑,透露出一丝神秘气息:“说出就意思了,你们可以猜猜看。”
几你看看,看看你,中都好奇和探。
对他话里真实倒一点怀疑。
因他们对陆时羡信任,早在长时间相处中得到了多次验证。
时间紧急,任务繁重。
几个心里都清楚接下时间可能会轻松了。
但也都做好了苦战得心理准备。
做科研耐得了寂寞行。
过陆时羡发现一向显得理智梅林此时居然显得些亢奋。
他好笑地摇摇头,忽然想到一句话:“如果旺盛好奇心和纯粹求知欲动力,就可能产生那些对类和社会具巨大价值发明创造。”
在个角度上,他认梅林和他一路。
多余寒暄,也多余解释。
四默契地到实验室。
陆时羡站在作台前直入主题。
“接下,可能大家要辛苦一点,将所测序准备工作做好,然所测序流程由作。”
“梅林、瑟琳和鲍你们分别负责DNA提取、文库构建和引物连接预处理作。”
“个工作结束,你们可以看作,什懂都可以问。”
闻言,三皆点头,异议。
个安排和他们预想差太多。
只过就测序仪只一台,又只陆时羡一个作。
相较于预处理,陆时羡工作就显得更繁复。
三代测序技术其实也就单分子测序技术,它能够直接读取单DNA分子序列信息,从而规避掉PCR扩增和文库扩增带风险。
但完美技术,项技术区别于高通量测序技术缺点测序信息量大且非常复杂,在测序过程中对力消耗很大。
三仿佛看见陆时羡即将爆肝样子,心中都对他发际线怜悯。
但他们对陆时羡想法一无所知。
接下,几都陷入了紧张而序忙碌中。
预处理看似只测序基础,但也随便个就能做。
他们台测序仪运用SMRT测序技术,它利用DNA多聚酶在放线观测下合成DNA,从而观察到DNA添加况,以此得到DNA序列信息。
文库制备预处理工作中最复杂一环,需要对基因组DNA进行片段化末端修复。
个作类似于进行最密手术,需要将发夹式接头连接到双链DNA分子两端,然形成一个封闭圆圈。ωωw..net
再将引物和聚合酶退到接头上,最就能形成一个哑铃状待测序文库。
光个流程就耽误了三四天时间。
三个过现学,然依次进行了作。
最结果让陆时羡很意外。
在种细实验作上,鲍表现居然比作女生瑟琳要好。
综合制备时间和效果,他得到文库过查验标准程度比较高。
虽然和陆时羡亲手制备比了,但用进行测序基本足要求了。
看着几都诧异地望着自己,鲍虽然也很意外,但在脸上毫无显现,然骄傲地抬起头。
“看什?”
“难道允许偷偷努力,然惊艳所吗?”
过,都朝夕相处队友,彼此什习惯和水平都清楚。
估计瞎猫碰上死耗子,但梅林和瑟琳好意思去打击他。
“假装信了。”陆时羡嘴上说着,心中比较开心。
一个团队如果一直只靠固定那几个,会存在太久。
一个力和时间限,而探索无边宇宙和世界奥秘事业&xe001无限。
也就注定单打独斗走远。
能够站出,分担一下他压力,陆时羡感到些欣慰。
“很好,那文库制备块工作就由鲍负责,梅林你和瑟琳在完成其他步骤进行协助就好了。”
接下几天,过断磨合。
个四小团队才逐渐走入了正轨。
办法,和陆时羡种以前熟练掌握过一样,在项技术上,三几乎从头开始学习。
而且就只前置准备工作,就几乎花费了一个星期时间。
“你们前知道在片段化作中,个过程随机,因此可能会出现平齐末端,也可能出现平末端,因此要进行末端修复,将产生所3''5''突出黏末端转化成平末端。”陆时羡正解答着自鲍问题,
过对新技术断上手作,再结合他以前实验历,彼此碰撞下,鲍产生了一些疑惑。
他问题:“末端修复加A碱基很好理解,了产生粘末端,但进行接头连接全过程都要用到T4DNA聚合酶,让他些解。
个问题比较基础,只能说鲍前留意聚合酶各种作用。
但陆时羡也耐烦,认真答道:“那因T4DNA聚合酶全程都在起作用,它原理仅能够从5''至3''方向催化合成DNA,补平5''突出末端,也具3''至5''外切酶活,帮助对3''突出末端进行切平,最将黏末端DNA片段转变平末端DNA。”
紧接着,梅林也贡献了一个问题。
他颇疑惑地问道:“们样本里面RNA中最多rRNA,如果直接对最得到RNA文库进行测序,那数据里面可能会存在rRNA测序数据,个数据怕会一些误差?”
陆时羡断在心中点头。
梅林能想到一点,足以见到他思维连贯。
办法,个问题确实问很关键,几乎决定了测序工作成功与否。
而他前都主动提及一环,想着自己亲自上手处理时候在说一下。
但现在既然说到,提前一下也行。
事实上,梅林判断些保守了。
几你看看,看看你,中都好奇和探。
对他话里真实倒一点怀疑。
因他们对陆时羡信任,早在长时间相处中得到了多次验证。
时间紧急,任务繁重。
几个心里都清楚接下时间可能会轻松了。
但也都做好了苦战得心理准备。
做科研耐得了寂寞行。
过陆时羡发现一向显得理智梅林此时居然显得些亢奋。
他好笑地摇摇头,忽然想到一句话:“如果旺盛好奇心和纯粹求知欲动力,就可能产生那些对类和社会具巨大价值发明创造。”
在个角度上,他认梅林和他一路。
多余寒暄,也多余解释。
四默契地到实验室。
陆时羡站在作台前直入主题。
“接下,可能大家要辛苦一点,将所测序准备工作做好,然所测序流程由作。”
“梅林、瑟琳和鲍你们分别负责DNA提取、文库构建和引物连接预处理作。”
“个工作结束,你们可以看作,什懂都可以问。”
闻言,三皆点头,异议。
个安排和他们预想差太多。
只过就测序仪只一台,又只陆时羡一个作。
相较于预处理,陆时羡工作就显得更繁复。
三代测序技术其实也就单分子测序技术,它能够直接读取单DNA分子序列信息,从而规避掉PCR扩增和文库扩增带风险。
但完美技术,项技术区别于高通量测序技术缺点测序信息量大且非常复杂,在测序过程中对力消耗很大。
三仿佛看见陆时羡即将爆肝样子,心中都对他发际线怜悯。
但他们对陆时羡想法一无所知。
接下,几都陷入了紧张而序忙碌中。
预处理看似只测序基础,但也随便个就能做。
他们台测序仪运用SMRT测序技术,它利用DNA多聚酶在放线观测下合成DNA,从而观察到DNA添加况,以此得到DNA序列信息。
文库制备预处理工作中最复杂一环,需要对基因组DNA进行片段化末端修复。
个作类似于进行最密手术,需要将发夹式接头连接到双链DNA分子两端,然形成一个封闭圆圈。ωωw..net
再将引物和聚合酶退到接头上,最就能形成一个哑铃状待测序文库。
光个流程就耽误了三四天时间。
三个过现学,然依次进行了作。
最结果让陆时羡很意外。
在种细实验作上,鲍表现居然比作女生瑟琳要好。
综合制备时间和效果,他得到文库过查验标准程度比较高。
虽然和陆时羡亲手制备比了,但用进行测序基本足要求了。
看着几都诧异地望着自己,鲍虽然也很意外,但在脸上毫无显现,然骄傲地抬起头。
“看什?”
“难道允许偷偷努力,然惊艳所吗?”
过,都朝夕相处队友,彼此什习惯和水平都清楚。
估计瞎猫碰上死耗子,但梅林和瑟琳好意思去打击他。
“假装信了。”陆时羡嘴上说着,心中比较开心。
一个团队如果一直只靠固定那几个,会存在太久。
一个力和时间限,而探索无边宇宙和世界奥秘事业&xe001无限。
也就注定单打独斗走远。
能够站出,分担一下他压力,陆时羡感到些欣慰。
“很好,那文库制备块工作就由鲍负责,梅林你和瑟琳在完成其他步骤进行协助就好了。”
接下几天,过断磨合。
个四小团队才逐渐走入了正轨。
办法,和陆时羡种以前熟练掌握过一样,在项技术上,三几乎从头开始学习。
而且就只前置准备工作,就几乎花费了一个星期时间。
“你们前知道在片段化作中,个过程随机,因此可能会出现平齐末端,也可能出现平末端,因此要进行末端修复,将产生所3''5''突出黏末端转化成平末端。”陆时羡正解答着自鲍问题,
过对新技术断上手作,再结合他以前实验历,彼此碰撞下,鲍产生了一些疑惑。
他问题:“末端修复加A碱基很好理解,了产生粘末端,但进行接头连接全过程都要用到T4DNA聚合酶,让他些解。
个问题比较基础,只能说鲍前留意聚合酶各种作用。
但陆时羡也耐烦,认真答道:“那因T4DNA聚合酶全程都在起作用,它原理仅能够从5''至3''方向催化合成DNA,补平5''突出末端,也具3''至5''外切酶活,帮助对3''突出末端进行切平,最将黏末端DNA片段转变平末端DNA。”
紧接着,梅林也贡献了一个问题。
他颇疑惑地问道:“们样本里面RNA中最多rRNA,如果直接对最得到RNA文库进行测序,那数据里面可能会存在rRNA测序数据,个数据怕会一些误差?”
陆时羡断在心中点头。
梅林能想到一点,足以见到他思维连贯。
办法,个问题确实问很关键,几乎决定了测序工作成功与否。
而他前都主动提及一环,想着自己亲自上手处理时候在说一下。
但现在既然说到,提前一下也行。
事实上,梅林判断些保守了。